细菌/真菌基因编辑

微生物，如大肠杆菌和酿酒酵母，广泛应用于工业微生物生产，利用代谢工程以及合成生物学的方法能够在基因组水平高效地实现对多种微生物的代谢工程改造，为人工设计构建高效的细胞工厂和新型的生物催化剂，为实现重要化合物的生物合成提供技术平台，提升微生物在医药、农业、工业等多个领域中的应用价值。

艾森生物是一家专业的微生物基因编辑公司，可根据客户的具体需求提供一对一的方案定制服务。可进行编辑的细菌、真菌种类覆盖当前热门研究领域，敲除、敲入、点突变均可实现。

一、微生物基因编辑技术原理

1. CRISPR/Cas9基因编辑系统：创新性结合CRISPR/Cas9系统和Red/ET重组系统，利用CRISPR/Cas9系统的高效定点切割优势，以及Red/ET高效重组优势，极大提高了细菌和真菌的基因编辑的效率。而且还能实现无痕编辑，大大提高后续实验可靠性。

2. 位点特异性基因重组系统：Cre-lox 系统来源于大肠杆菌P1 噬菌体，可以促使噬菌体DNA插入到细菌基因组中。Cre 重组酶可以识别长度为34 bp 具有方向性的loxP位点。同一DNA分子上同向的两个loxP 位点发生重组，可以删除两个loxP 位点之间的DNA片段；同一DNA 分子上反向的两个loxP 位点发生重组，可以使两个loxP 位点之间的DNA片段发生倒置。在细菌基因编辑中，Cre-lox 重组系统常用作删除选择标记基因、大片段基因的删除和倒置等。

3. 同源重组系统：在细菌中引入两端具有与受体基因组DNA同源片段的外源dsDNA 分子，借助于λ-Red 重组系统或RecE/T 重组系统，诱发同源片段中间的外源DNA 序列与基因组序列发生交换，可实现基于同源重组的基因编辑。

二、微生物基因编辑定制服务

三、基因编辑微生物技术流程

1. 根据客户需求、细菌/真菌类型和靶基因的情况进行基因编辑方案设计

2. 构建编辑载体

3. 制备感受态以及电转

4. 抗性筛选获得阳性克隆菌株

5. 对编辑后的菌落进行PCR鉴定和靶位点测序鉴定

四、微生物基因编辑技术核心

1. 无痕基因敲除：利用Red/ET重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统结合，实现高效定点切割，并消除外源质粒。

2. 无痕基因点突变：利用CRISPR/Cas9系统的高效定点切割优势，实现基因组定点突变。

3. 无痕基因敲入：利用Red/ET重组系统和CRISPR/Cas9基因编辑系统结合，实现基因组定点敲入。

五、微生物基因编辑技术优势

1. 高效定点切割：利用CRISPR/Cas9系统的高效定点切割优势，极大提高了细菌基因编辑的效率。

2. 无痕编辑：可实现无痕敲除（不残留抗性或重组位点），同时消除外源质粒。

3. 操作简单：通过电转的方法将CRISPR载体导入细菌体内进行基因编辑，可实现敲除、点突变和敲入等操作。

4. 靶向性强：CRISPR技术具有靶向性强、脱靶率低等优势，可实现对特定基因的精准编辑。

5. 适用范围广：可实现多种微生物的编辑服务，包括细菌、真菌等。