艾森生物依托成熟的AI-CRISPR™细胞基因编辑平台和完善的细胞培养体系,CRISPRi (基因抑制/沉默)系统是用于抑制内源性基因转录的强大工具,当dCas9(没有切割活性的Cas9)被引导到靶基因的转录起始位点TSS(transcription start site)时,dCas9能够物理性阻碍RNA聚合酶的通过,导致基因沉默。同时dCas9融合了一个基因抑制结构域,如KRAB结构域,这样的蛋白称之为dCas9-KRAB,可以进一步提高转录抑制的效率。此外,dCas9也可以融合双抑制结构域KRAB-MeCP2,抑制效果更佳。


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一、CRISPRi细胞定制服务

基因编辑细胞服务详情,超300种细胞成功案例!

细胞类型 常规细胞系、肿瘤细胞系、IPS/ES等各类细胞
服务类型 单基因/多基因抑制
交付成果 Cell Pool/单克隆
周期/价格 在线咨询;添加官方微信号:18520176000(手机同号)

二、CRISPRi技术原理

dCas9-KRAB CRISPRi系统是在DNA水平抑制基因表达,因此适用于多种类型的基因,包括:mRNA、非编码RNA、microRNA、反义转录本、核定位RNA以及聚合酶III 转录本等基因的转录抑制。

 

三、服务流程及质量控制

优化实验流程,有效提升编辑效率:基因/细胞分析→sgRNA设计→慢病毒包装→药物筛选→QPCR鉴定→扩增冻存。

 

四、AI-CRISPR™技术优势

1. AI-CRISPR™技术优势:AI-CRISPR™基因编辑轻松实现基因激活和抑制表达;拥有更高的基因切割效率,基因编辑效率提升10-20倍。

2. 成熟的技术平台:大量成功案例,在超300种细胞中成功实现超数千例基因编辑;可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证及表型分析的全流程服务。

3. 严格的质量控制体系:进行细菌、支原体等微生物的双重检测,确保100%无污染,并充分鉴定基因编辑效果;进行细胞活率检测,保证交付质量。

五、CRISPRi vs ORF过表达

研究基因功能最常见的方法是,减少或者阻断基因表达,然后进行表型分析。RNAi和CRISPRi都是常用的基因表达水平敲低的研究工具。

特点 CRISPRi RNAi
靶向分子 DNA转录起始位点 mRNA
作用位置 细胞核内 细胞质
脱靶效率 较低
起作用分子 sgRNA+dCas9 siRNA